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發(fā)布于 2022-05-10
β-半乳糖苷酶的應用
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β-半乳糖苷酶是一種重要的糖苷水解酶,在乳制品、食品和制藥行業(yè)具有潛在應用。該酶由細菌和酵母在細胞內(nèi)環(huán)境中產(chǎn)生。

β-Galactosidase.png

催化反應

β-半乳糖苷酶的活性端通過“淺層”與“深層”結合基質(zhì)來催化水解雙糖。一價的鉀離子(K +),以及二價的鎂離子(鎂2 +)需要酶的最佳活性。以β-核苷間鍵為基質(zhì)經(jīng)由谷氨酸側鏈上的羧基終端裂解而成。 在大腸桿菌中,谷氨酸-461被認為是取代反應的親核試劑。然而,現(xiàn)在已經(jīng)知道谷氨酸-461是一種酸[催化劑]。相反的,谷氨酸-537為實際的親核試劑,他是結合到半乳糖的中間體。

在人類中,是由Glu-268扮演水解反應的親合試劑。

β-半乳糖苷酶所催化的反應

應用

β-半乳糖苷酶檢測常用于遺傳學、分子生物學,以及其他生命科學??捎糜谒{/白篩檢測中,有活性的酶可以用X-gal來進行檢測,會在裂解β-半乳糖苷后形成一個深藍色的產(chǎn)物5-溴-4-淀藍,并且容易辨識和量化。它的生產(chǎn)可以透過非水解性誘導結構異構物中的異乳糖─IPTG,從lac操作者中結合并釋放lac操縱子,從而使轉錄起始端繼續(xù)進行。

因為他的高表現(xiàn)性質(zhì)以及它在衰老細胞中的溶酶體累積的特性。盡管有其局限性,它可被當作一個老化的標志物,借由進行體內(nèi)和體外在定性和定量可用以測定老化程度。


作者:未知 來源:未知
2022-05-10
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