隨著體外診斷試劑行業(yè)的跨越式進(jìn)步，現(xiàn)在已形成了一整套的產(chǎn)業(yè)鏈，包含上游廠家的原料供應(yīng)，中游試劑成品的研發(fā)生產(chǎn)銷售，下游市場(chǎng)需求等。其中上游廠家核心原料的供應(yīng)質(zhì)量非常關(guān)鍵，直接決定著下面試劑成品的開(kāi)發(fā)，像上游的核心原料：酶、抗原抗體、緩沖劑，采血管添加劑、顯色底物、發(fā)光試劑等，都必須要求精細(xì)化生產(chǎn)。下面，具體給大家介紹一下應(yīng)用較為廣泛的核心原料—酶。

一、原料酶研發(fā)的基本原則

獲取酶的主要方式就是通過(guò)純化，所以蛋白純化技術(shù)和抗體的制備技術(shù)成為了活性原料開(kāi)發(fā)的關(guān)鍵，也是基本原則，可能會(huì)涉及到多個(gè)學(xué)科。

二、原料酶的規(guī)模化制備

整個(gè)制備過(guò)程包含了準(zhǔn)備原料，預(yù)處理和初次提純，精準(zhǔn)提純幾個(gè)步驟，其中準(zhǔn)備原料是直接選擇動(dòng)植物的細(xì)胞或通過(guò)基因手段得到。原料的預(yù)處理，就是利用一些手段來(lái)使細(xì)胞組織破碎，也可通過(guò)反復(fù)凍融或表面活性劑來(lái)進(jìn)行處理，不過(guò)需要注意擊碎組織細(xì)胞的力度大小，有時(shí)候力度小，會(huì)釋放得不充分，力度大，會(huì)使其變性，原料破碎后會(huì)逐漸變得渾濁，可以通過(guò)離心的方式去除。

初次提純是通過(guò)沉淀或離心濾法的方式進(jìn)行，常用的有硫酸銨沉淀法，或利用一些有機(jī)溶劑進(jìn)行沉淀。精準(zhǔn)提純方式主要是根據(jù)分子結(jié)構(gòu)大小，分布情況或親疏水性質(zhì)等進(jìn)行的各種分離層析，包含了離子交換層析，疏水層析等。

三、原料酶的保存

影響酶活性原料溶液狀態(tài)的因素大致有PH值變化，離子強(qiáng)度、保存條件，反復(fù)凍融次數(shù)等，通常是可以通過(guò)添加一系列的緩沖體系，抑制劑或還原劑來(lái)維持穩(wěn)定，很常見(jiàn)的就是凍干保存。

四、原料酶的質(zhì)量控制

其中控制酶質(zhì)量的關(guān)鍵是在于對(duì)批次提純后的原料酶進(jìn)行鑒定，其中包含濃度和純度，活性鑒定，較為常用的方法為酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定或蛋白定量，出廠銷售的酶原料應(yīng)該是高純度，高活性且外觀、濃度都有所達(dá)標(biāo)。