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        發布于 2024-08-13
        如何使用D-熒光素鉀鹽
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        熒光素鉀鹽使用說明:
        D-熒光素鉀鹽(K+)設計用于體外和體內生物發光測定。D-熒光素鉀鹽一般為黃綠色,激發波長為494nm,發射波長為521nm。D-熒光素的質量和純度對于獲得良好和可重復的結果至關重要。


        二、D-熒光素鉀鹽的使用方法:

        1. 溶液的制備
        D-熒光素鉀鹽的溶液可以用于染色、標記、檢測等多種應用。
        制備D-熒光素鉀鹽溶液的方法:
        a.首先稱取適量的D-熒光素鉀鹽,加入適量的去離子水中后進行均勻攪拌;
        b.使用過濾膜將溶液過濾,除菌。
        c.將D-熒光素鉀鹽溶液調節至所需要的濃度。

        2. 染色實驗過程
        D-熒光素鉀鹽可以用于細胞染色、組織染色等染色實驗,實驗方法如下:
        a.首先將細胞或組織樣本固定在載玻片上。
        b.然后加入適量的D-熒光素鉀鹽溶液,使試劑溶液可以覆蓋樣本。
        c.在黑暗條件下可以孵育一段時間,使D-熒光素鉀鹽充分滲透入細胞或組織中。
        d.使用PBS緩沖液洗滌樣本,去除多余的D-熒光素鉀鹽。
        e.在顯微鏡下觀察樣本,觀察樣品的熒光信號。

        3. 實驗標記
        D-熒光素鉀鹽也可以用于標記蛋白質、核酸等生物分子。
        實驗標記方法:
        a.首先將蛋白質或核酸與d-熒光素鉀鹽共同孵育。
        b.再用凝膠電泳等方法分離標記后的生物分子。
        c.最后在熒光顯微鏡下觀察標記后的生物分子即可。

        4. 檢測方法
        D-熒光素鉀鹽可用于檢測生物分子的存在和濃度。
        D-熒光素鉀鹽檢測方法:
        a.將d-熒光素鉀鹽與待檢測的生物分子進行共同孵育。
        b.用凝膠電泳等方法分離孵育后的混合物。
        c.在熒光顯微鏡下觀察熒光信號,即可判斷生物分子的存在和濃度。


        1.說明
        1.1.簡介及特點
        D-熒光素,鉀鹽是一種合成螢火蟲熒光素。這種高純度、無內毒素的產品
        非常適合體外和體內生物發光測定。高質量的基板消除了可能由于內毒素的存在而干擾測定。中性條件下的正確包裝確保了產品的完整性和穩定性。這種螢光素酶的水溶性基質是現成的,易于使用。
        主要特點有:
        ?高純度>99.5%
        ?溶解性好,靈敏度高
        ?用于生物發光測定的可靠體內報告基因
        ?不含內毒素(非常適合體內應用)
        ?適用于體外實驗
        ?易于使用
        ?在整個動物體內快速和更容易分布


        -熒光素,鉀鹽:
        ?化學名稱:4,5-二氫-2-(6-羥基-2-苯并噻唑基)-4-噻唑羧酸鉀鹽
        ?分子式:C11H7N2O3S2K
        ?分子量:318.42 g/mol
        ?CAS編號:115144-35-9
        ?分子生物學等級和高級純度:99.7%純度。通過九個獨立標準驗證質量包括HPLC和FTIR。


        1.2穩定性和儲存
        ※ D-熒光素對光、氧氣和水分敏感,呈粉末狀和溶液狀。
        ※ 儲存(粉末)收到并長期使用后,將粉末儲存在密閉的干燥容器,-20°C。D-熒光素在-20℃下至少穩定一年干燥和中性氣體條件。
        ※ 如果裝有D-熒光素粉末的瓶子必須反復打開和關閉,建議用惰性物質填充小瓶氣體(氬氣或氮氣)。
        ※ 儲存(溶液)D-熒光素儲備溶液可以在水中或D-PBS中制備,然后在-20°C下冷凍或優選在-80°C下。D-熒光素溶液的穩定性是相當有爭議的
        ※ 解決方案:盡管存在以上問題,冷凍的D-熒光素溶液(-80°C)仍然適合使用,D-熒光素是在低pH(<6.5)和高pH(>7.5)下相當不穩定。為了避免重復的冷凍和解凍循環,我們建議用小管等分D-Luciferin溶液,并將其儲存在-80°C下。


        2.應用
        ※ 活細胞、組織和動物模型中的生物發光測定
        ※ 螢光素酶報告基因測定
        ※ 全動物成像(體內和體外基因測定)
        ※ 熒光素酶基因實驗
        ※ ATP測定(螢光素酶催化ATP轉化為AMP)和免疫測定
        ※ 焦磷酸測序
        ※用于序列基因分析實驗

        作者:未知 來源:未知
        2024-08-21
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