“四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT法)”
即四甲基偶氮唑鹽微量酶反應比色法。MTT是一種噻唑鹽,化學名3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑,水溶液為黃橙色。小鼠脾細胞受到ConA作用后發(fā)生增殖活化,其胞內線粒體琥珀酸脫氫酶活性相應升高,MTT作為其底物參與反應,形成藍色的甲臜(Formazan)顆粒沉積于細胞內或細胞周圍,經(jīng)鹽酸—異丙醇溶解后為藍色溶液,可用酶標測定儀測定細胞培養(yǎng)物的OD值,測定波長570nm。根據(jù)OD值的大小計算反應體系中細胞增殖程度。
目前MTT法常用于以下幾個方面的研究:
1、檢測細胞活性:常作為細胞毒性試驗的一種方法。
2、體外藥物敏感實驗:該方法簡便、經(jīng)濟、快速,重復性好,所需的細胞數(shù)較少,目前廣泛的用于臨床前的抗癌藥物的篩選研究。
3、一些細胞因子活性的研究。