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        發布于 2026-01-20
        DTT、巰基乙醇、TCEP以及2-MEA四大還原劑
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        還原劑---抗體工程中的“分子剪刀”

        在IVD檢測與抗體藥物偶聯(ADC)中,二硫鍵的精準操控是核心技術之一。強還原可能導致抗體結構崩塌,弱還原則無法釋放活性巰基。如何根據實驗需求,在DTT、巰基乙醇、TCEP、2-MEA四大還原劑中做出最優選擇?

        PART 01
         “結構特點”和機理

        1.1. DTT

        中文名稱:二硫蘇糖醇,1,4-二硫蘇糖醇,二硫代蘇糖醇,Cleland試劑

        英文名稱:DL-Dithiothreitol

        CAS號:3483-12-3

        化學式:C4H10O2S2,含兩個巰基(-SH)的線性分子 

        分子量:154.25 g/mol

        外觀:白色固體

        溶解性:易溶于水

        儲存條件:-20℃


        1.2. 巰基乙醇(β-ME)

        中文名稱:2-巰基乙醇,巰基乙醇,β-巰基乙醇

        英文名稱:2-Mercaptoethanol

        CAS號: 60-24-2

        化學式:C2H6OS,單巰基短鏈醇。  

        分子量:78.13。 

        外觀:無色透明液體

        溶解性:能與水、乙醇、乙醚和苯以任意比例混溶

        儲存條件:2~8℃,密封儲存,防潮

        還原機理通過巰基與二硫鍵交換,但還原能力較弱,需較高濃度。適合pH 8-9 可能殘留部分二硫鍵

        1.3. TCEP?HCl

        中文名稱:三(2-羧乙基)膦鹽酸鹽,三羧基乙基膦鹽酸鹽

        英文名稱:Tris (2-carboxyethyl) phosphine hydrochloride

        CAS號:51805-45-9

        化學式:C9H15O6P,含膦基(PH?)的三羧酸化合物

        分子量: 286.65

        外觀:白色粉末

        溶解性:易溶于水

        存儲條件:-20℃或4℃保存

        還原機理:直接通過親核攻擊還原二硫鍵,不依賴巰基,在酸性至中性(pH 1.5-8.5)均有效。無副反應(如二硫鍵重排)。

        1.4. 2-MEA

        中文名稱:2-巰基乙胺鹽酸鹽,半胱胺鹽酸鹽

        英文名稱:2-Aminoethanethiol hydrochloride

        CAS號:156-57-0

        化學式:C2H8ClNS,含巰基和氨基的乙胺衍生物

        分子量:113.61

        外觀:結晶粉末或顆粒

        溶解性:在水中溶解良好

        存儲條件:4℃干燥保存

        還原機理巰基參與還原,氨基可能輔助結合或調節pH,適合堿性條件(pH >8)。  常用于溫和條件或輔助其他反應。

        1 常用4種還原劑的結構


        PART 02
        特性對比:還原能力與穩定性

        2.1. 還原能力與選擇性

        DTT/巰基乙醇:廣泛用于完全還原(如SDS-PAGE),但破壞所有二硫鍵。 

        TCEP:最強還原力,適用于低pH或長期反應。 

        2-MEA:唯一可選擇性剪切鉸鏈區二硫鍵,保留抗體功能。  

        2 用2-巰基乙胺(2-MEA)選擇性還原IgG(免疫球蛋白G)鉸鏈區的二硫鍵

        2.2. 穩定性與毒性

        PART 03

        應用場景:
        PART 04
        總結:還原劑選擇的“黃金法則”

        強還原需求:首選TCEP(高效穩定)或DTT(完全還原)。 

        常規低成本:巰基乙醇(注意通風防護)。 

        精準剪切抗體鉸鏈區:僅2-MEA可勝任(搭配EDTA與脫鹽步驟)。


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